【六胺银染色法】
用于卡肺孢子虫的染色。
[试剂]
Ⅰ 2% 铬酸 氧化铬 10.0 g
蒸馏水 500.0 ml
混合,溶液有效期6 个月
Ⅱ 1% 亚硫酸钠 亚硫酸钠 5.0g
蒸馏水 500.0 ml
混合,溶液有效期6 个月
Ⅲ 5% 硫代硫酸钠 硫代硫酸钠 5.0 g
蒸馏水 100.0 ml
混合,溶液有效期3 个月
Ⅳ 乌洛托品银储存液 3%乌洛托品(六亚甲基四胺) 100.0 ml
5% 硝酸银 5.0 ml
混合,保存在耐酸的棕色瓶内，4 ℃冰箱冷藏溶液有效期3 个月
Ⅴ 0.5% 氯化金 氯化金 0.5 g
蒸馏水 100 ml
混匀,保存在耐酸的瓶中,冷藏.有效期1 年
Ⅵ 0.2% 亮绿 黄色淡绿SF 0.2 g
蒸馏水 1000 ml
冰醋酸 0.2 ml
混匀,有效期6 个月
工作溶液： Ⅳ液 25.0 ml
蒸馏水 25.0 ml
5% 硼砂溶液 2.5 ml
使用前混合,使用后丢弃
[使用方法]
1) 在Ⅰ液中氧化1 h(病理组织标本需要事先脱蜡)；
2) 用自来水清洗；
3) 滴加Ⅱ液室温中浸润1min；
4) 用蒸馏水清洗3 次；
5) 水浴中预热六胺银染色工作溶液至56 ℃ ，滴加工作液染色，并摇动玻片直到涂膜颜色变暗黄色或灰色；
6) 蒸馏水冲洗2 次；
7) 滴加Ⅴ液，覆盖1 min，直到玻片内容物变褐色；
8) 蒸馏水冲洗；
9) 滴加Ⅲ液，覆盖3 min；
10) 蒸馏水冲洗；
11) 滴加Ⅵ液，染色1min；
12) 蒸馏水冲洗；
13) 在无水酒精中脱水干燥，后上显微镜镜检。
卡氏肺孢子虫染为黑色，背景绿色或蓝绿色。
[质量控制]
如果Ⅰ液变成褐色需要重新配制；如果菌体没有变成黑色 检查Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ液是否过期；一般工作液需要临时配制，如果配好的工作银液在应用时，玻片上变成云雾状或成镜状 应重新配制。
[ 本帖最后由 巴斯德之徒 于 2009-2-25 10:12 编辑 ] |
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